期刊简介
本刊是全国唯一以实用为主，指导临床的综合性老年医学杂志，内容包括了老年医学的基础理论，临床医疗，预防保健及流行病学等方面，适合从事老年医学及医疗保健工作的医务人员阅读。
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首页>实用老年医学杂志
- 杂志名称：实用老年医学杂志
- 主管单位：江苏省卫生厅
- 主办单位：江苏省老年医学研究所
- 国际刊号：1003-9198
- 国内刊号：32-1338/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：国家“双效”期刊期刊收录：Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中)
甲型H1N1流感病毒血凝素HA1蛋白的真核表达与纯化
李燕；迟莹；卞倩；温恬；张文帅；焦永军
关键词：甲型SwH1N1流感病毒, HA1基因, 克隆, 杆状病毒真核表达系统, 蛋白纯化
摘要：目的 构建甲型SWH1N1流感病毒血凝素HA1蛋白的杆状病毒真核表达载体,转染sf9细胞表达并纯化其编码蛋白.方法 从江苏甲型H1N1流感病毒毒株[A/Jiangsu/1/2009( H1N1)]提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增HA1基因,将其克隆至pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T/HA1质粒,双酶切pMD18-T/HA1与p-fast后,连接构建真核表达载体p-fast-HA1,转化DH10Bac细胞,转座构建杆状病毒HA1-Bacmid,经酶切及测序鉴定后将HA1 -Bacmid转染到sf9细胞中,通过免疫印迹法鉴定HA1蛋白的表达,采用亲和层析法纯化HAl蛋白.结果 经双酶切、测序鉴定证实HA1基因的真核表达载体构建成功；免疫印迹法证实HA1基因的表达；纯化获得了高纯度的HA1蛋白.结论 成功克隆了HA1基因,并构建了其杆状病毒真核表达载体,该表达载体的构建为后期的流感快速检测以及基因工程疫苗制备奠定了良好的基础.
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